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NuSmart®核酸直接釋放技術和標準核酸提取技術差別
更新時間:2024-03-15   點擊次數:788次

NuSmart®核酸直接釋放技術和標準核酸提取技術差別

基因組DNA提取作為分子生物學最常規技術之一是每個實驗室研究人員最熟悉的技術。而想獲得基因組DNA只需要將核酸外的結構破壞就能夠將核酸釋放出來。常見有以下幾種方法,包括機械力裂解、酶裂解以及化學裂解。這幾種方法的區別見下表:

方法

機械力裂解

酶裂解

化學裂解

原理

外力破壞細胞壁和/或細胞膜

消化蛋白質結構以及破壞組蛋白的纏繞

緩沖液體系中加入去垢劑破壞脂膜并釋放內部成分

優勢

操作簡單、快速

無需機械力

操作簡單

無需其他設備

劣勢

多樣本時比較耗時

處理過長中產熱導致基因組降解

基因組容易斷裂

需要研磨設備

價格昂貴

耗時

 

釋放的抑制物對下游擴增有影響

不適合細胞器基因組的獲得

 

落實在產品上,實驗室標準核酸提取純化包括有機提取、硅膠柱離心提取、磁珠吸附提取。這幾種方法對比如下表:

方法

有機提取

硅膠柱提取

磁珠提取

原理

苯酚-氯仿抽提和離心進行分離和純化

通過機械力和/或酶裂解釋放核酸,硅膠柱與其形成靜電吸附,通過離心和鹽粒子洗滌進行分離純化

通過機械力和/或酶裂解釋放核酸,帶電磁珠與其吸附,在磁場作用下進行分離純化

樣品

細胞、組織、植物等

所有樣品類型

所有樣品類型

純度

通量

低通量

中通量

高通量

優勢

充分裂解

價格便宜

特別適合難處理樣本

操作方便

產量和純度都高

可處理多種樣本

產量高

不會堵塞

可設備自動化操作

劣勢

使用有毒有害化學試劑

不易購買

容易堵塞

產量有上限

不利于微量樣本操作

耗時

30-60分鐘

30-60分鐘

30分鐘

通過對比發現以上方法操作復雜、費時費力且危險,為了解決這一問題,我們推薦NuSmart®核酸直接釋放技術。該方法只需要5分鐘,不同溫度環境下,無需重復訓練即可完成核酸直接釋放。結合下游開發試劑盒,能夠滿足常規分子生物學實驗室的需求。

方法

(NuSmart®核酸直接釋放技術)

標準/傳統核酸提取法

原理

通過試劑破壞細胞壁/膜和細胞核膜,釋放基因組DNA。特殊納米材料提高PCR靈敏度

通過機械力和/或酶裂解細胞釋放核酸,硅膠柱等材料與其吸附,通過離心/磁場作用進行提取純化

樣品

任何樣本類型

任何樣本類型

樣品量

細胞:1-103

組織:1-2mm

植物葉片:1-4mm

微生物培養液:10uL

細胞:>106

組織:>10mg

植物葉片:>100mg

微生物培養液:0.5-1mL

耗時

5分鐘

30-60分鐘

通量

高通量

硅膠柱法:中通量

磁珠法:高通量

優勢

對于小量和微量樣本十分友好

操作簡單,無需訓練

基因組完整性好

無酶、無有機試劑

無大型設備投入

 

操作方便

產量高

純度高

劣勢


基因組容易斷裂

操作步驟多、費時

需要設備

 

 

 

 

 


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